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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
B95-8細胞，EBV 轉化的絨猴白細胞 人大腸癌細胞,CL187/CCL187細胞 CM-H125人腦成纖維細胞*培養基100mL匹格列酮-d4質量規格：美國進口Pioglitazone-d4

大鼠肝細胞;BRL 3A羥基匹格列酮（M-Ⅶ）質量規格：美國進口Hydroxy Pioglitazone (M-VII)

GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-去乙基5-羧基匹格列酮質量規格：美國進口5-Desethyl 5-Carboxy Pioglitazone

小鼠胚胎成纖維細胞MEF酮基匹格列酮（M-Ⅲ）質量規格：美國進口Keto Pioglitazone (M-III)

MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶鈉(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品 sulfadiazine(SD-Na)
293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸靜脈內皮細胞*培養基100mL 人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg戊二酸(>98%,BR)質量規格：>98%,BRGlutaric acid

CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基100mL戊二1(>96%,BR)質量規格：>96%,BRGlutaric anhydride

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸博萊霉素/博來霉素/爭光霉素質量規格：含量1.5~2.0U/mg,BRBleomycin sulfate

小鼠小膠質細胞MM硼替佐米/保特佐米質量規格：含量> 99%Bortezomib

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 膀胱變移細胞癌，T-24細胞 U251(膠質瘤細胞)硼替佐米(標準品)質量規格：>99%,光學度>98%,標準品Bortezomib
IL12RB2 Others Mouse 小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁氧羰基-L-，英文名或英文縮寫：Boc-L-alaninol，級別：BR，98%，規格：1克

人肺癌細胞;A549 [A-549]安基加醋芐酯 Bqnzyl ccrbcmctq 61-84-1

CLEC4B2 Others Rat 大鼠 CLEC4B2 / mDCAR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Medium 9041-35-4 25G 分離試劑

CL-0425RKO-AS45-1(人結腸癌轉基因細胞)5×106cells/瓶×25′-UMP，2Na尿苷-5′-單嶙酸二鈉鹽250毫克高，98%

XJH細胞，B細胞 人男性正常細胞系,HS68細胞 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810](麥芽提取瓊脂)
銅藍蛋白CP測試盒測血清，除雞血清人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株 Human多拉菌素Doramectin質量規格：>97%,BR

人男性正常細胞;Hs683,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸，塞羅寧3,3',5'-Triiodo-L-thyronine質量規格：>97%,BR

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) Corylifol A(標準品)Corylifol A質量規格：HPLC≥98,標準品

人輸尿管上皮細胞*培養基 100mL溴芬酸鈉Bromfenac 質量規格：>98%,BR

B16BL6細胞，小鼠色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉化的人B細胞;KM932溴芬酸鈉(標準品)Bromfenac 質量規格：HPLC≥99,標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。