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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )質量規(guī)格：D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6

CM-H053人平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )質量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6

DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K

人海馬星形膠質細胞HA-h蛋白酶K(Sigma)質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K

Hs 181.Tes細胞，正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制劑質量規(guī)格：進分Chymostatin
人口腔角質細胞(HOK)( 5×105 ) NSC，大鼠神經干細胞 Rattus9-(2-羥丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine質量規(guī)格：美國進口

猴腎細胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羥丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine質量規(guī)格：美國進口

FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-1酸甘油酸激酶3-Phosphoglyceric Phosphokinase質量規(guī)格：1000u/mg,Sigma分裝

HPB-ALL(懸浮) T細胞白血病1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP質量規(guī)格：90.0%,Sigma

769-P人腎細胞腺癌細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸性蛋白酶；蛋白酶來自佐氏曲霉Acidic Protease from Aspergillus 質量規(guī)格：BR,50u/mg
人脂肪微血管內皮細胞HAMEC抗壞血酸；維生素C質量規(guī)格：AR;>99%Ascorbic acid；vitamin C

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質量規(guī)格：含量測定Ascorbic acid；vitamin C

非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質量規(guī)格：AROctadecanamine

NCI-H157細胞，人非小細胞肺腺癌細胞 小鼠肉瘤細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL山梨酸質量規(guī)格：AR,99%Sorbic acid

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品DL-Menthol
SmoISmlI，10 U/µLHBE(人支氣管上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細胞培養(yǎng)基CM去噻唑基 利托那韋Desthiazolylmethyl Ritonavir質量規(guī)格：美國進口

腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-去羅格列酮-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4質量規(guī)格：美國進口

RPRD1B Others Human 人 RPRD1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅格列酮（鉀鹽）Rosiglitazone (potassium salt)質量規(guī)格：美國進口

小鼠腹水瘤細胞;S-180羅格列酮鹽酸鹽rosiglitazone 質量規(guī)格：美國進口

HPAEC細胞，人肺動脈內皮細胞 猴腎細胞系,BSC-1細胞 CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮5-Hydroxy Rosiglitazone質量規(guī)格：美國進口
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。